实训二 细管冷冻精液的解冻及牛的人工授精技术

【实训目的】

（1）掌握细管冷冻精液的解冻技术。

（2）练习人工授精技术。

（3）掌握输精枪的操作。

【材料用具】

液氮罐、液氮、输精枪、输精枪外套、镊子、细管冻精、细管剪、温度计、温水、一次性手套、常用消毒剂。

【实训内容】

一、冷冻精液解冻后的活率检测

（一）材料准备

37℃环境温度、150～600倍显微镜、盖玻片和胶头吸管。

（二）工作过程

吸取适当解冻后的精液滴在载玻片上，用压片法立即在150~600倍显微镜下检查。检查精子活率用的显微镜载物台应保持35℃~38℃的温度。精子的活率用在显微镜视野下，呈直线前进运动的精子占全部精子数的百分率来评定。100%的精子呈直线前进运动者评为1.0，90%的精子呈直线前进运动者评为0.9，以此类推。解冻精液在输精前应保存在17℃~20℃温度下，以保持精液的活力。

二、人工授精

（一）材料准备

输精器、长臂手套、新洁尔灭、消毒水盆、剪刀。

（二）工作过程

1.输精前准备

（1）输精人员清洁双手。

（2）让母牛踩水促使其排尿、排粪，同时输精者左手戴好长臂手套，涂以润滑剂，手指并拢呈锥形，缓缓插入母牛肛门并伸入直肠，掏尽宿粪。

（3）用1/5000的新洁尔灭溶液清洗母牛外阴、尾根及臀部周围，再用温水浸湿毛巾擦干外阴部。

2.输精器械准备

安瓿型和颗粒型精液所用的输精器械和液态精液的相同，有玻璃、金属两种注射式输精器，还有一种一端带有橡皮球的滴管式输精器。塑料细管冷冻精液是用一种特制的带推杆的细管输精器（又名凯苏枪）输精。使用时，将经过解冻的细管冻精一端封口用特制的剪刀剪掉，拉回输精器推杆，将精液细管有纤维塞或钢珠的一端插到推杆上，套上外层塑料套管，使其前端和细管前端紧密接触，并做固定。输精时，慢慢推进金属推杆，把细管后端的纤维塞或钢珠顶向前端，即可把精液全部注入输精部位。

3.输精

（1）伸在直肠内的左臂用力向下压或向左侧牵动，使阴门开张，也可以让畜主将外阴部向一侧拉开。

（2）右手持吸有精液的输精器插入阴道内，注意不要触及外阴皮肤。

（3）输精器自阴门先向上斜插5~10 cm，再向前插入到子宫颈外口处。

（4）左手隔着直肠将子宫颈半握，使子宫颈下部固定在骨盆底上，右手抬高输精器尾部，轻轻向前推进，两手相互配合，边活动边向前插，不可用力过猛，以免损伤阴道壁和子宫颈，当感到穿过数个障碍物时，就已插入子宫颈或子宫体。

（5）将精液注入子宫颈后缓缓取出输精器，用左手轻轻揉捏子宫颈数次，防止精液倒流，然后拉出左手。

【注意事项】

如用凯苏枪输精，还应检查套嘴中是否有过多的残留精液，以判定输精是否成功。

【实训报告】

（1）图示输精枪构造。

（2）图示冷冻精液解冻后的活率。

（3）小组交流输精体会。填写牛的人工授精技术评价反馈单。