1 材料与方法

1.1 试验动物

健康Sprague-Dawley大白鼠32只，其中雄、雌各半，体重200～220g。随机分成4个实验组，每组8只，雄雌各半。实验前检疫1周，整个实验过程中，动物自由摄食饮水，室温20～22℃，相对湿度70%～85%。

1.2 主要试剂及配制

毒鼠强标准溶液（0.5mg/ml），由公安部物证鉴定中心提供，并用双蒸水依次将毒鼠强溶液稀释成0.3mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml溶液，以供进行动物试验之用；用丙酮稀释毒鼠强标准溶液（0.5mg/ml）于10ml容量瓶中，分别配制成0.01、0.05、0.1、0.5、2.5、5.0、10、25、50、100和200μg/ml毒鼠强标准工作溶液。氯仿、无水硫酸钠、丙酮等均为分析纯。

1.3 主要仪器及检测条件

HP6890 GC/5973 MS气相色谱/质谱联用仪，美国惠普公司。色谱分析条件：色谱柱Ultra-1为30m×0.20mm×0.33μm。柱温240℃，进样口和检测器温度分别为260℃和280℃。载气（氮气）流速0.7ml/min。进样方式：不分流。进样量1μl。MS分析条件：四极杆温度：150℃；离子源温度230℃；接口温度280℃；电子倍增管电压1894V；溶剂延迟：4分钟。

1.4 实验方法

1.4.1 SD大鼠体内染毒试验

根据GB15670-1995中华人民共和国国家标准《农药登记毒理学试验方法》进行，按体重以1ml/100g剂量，A、B、C、D组分别灌服0.5mg/kg、0.3mg/kg、0.1mg/kg、0.05mg/kg的毒鼠强，于实验鼠空腹情况下一次性灌胃染毒。

1.4.2 LD50测试方法[8]

灌胃后观察其中毒症状、体征和死亡情况，连续观察2周。记录各组死亡动物数，查表求LD50。

1.4.3 毒鼠强在各脏器浓度的测定

提取各不同中毒剂量死亡大鼠的血液、心、脑、肝、肺、脾、肾、胃及胃内容物等，以备检测各血液中毒物的含量及在各脏器中的分布。

1.4.3.1 毒鼠强标准工作曲线的建立

以外标法建立毒鼠强标准工作曲线。取不同浓度毒鼠强标样溶液1μl，注入GC/MS中，测定其离子色谱峰面积，以峰面积（y）对注入液体的浓度作图，建立离子色谱峰面积与毒鼠强浓度间的标准曲线。

1.4.3.2 血液及在各脏器中毒鼠强的提取

取1ml血液样品或1g组织样品，置于研钵中，加无水硫酸钠研干，用氯仿提取3次（每次用5ml），合并提取液，提取液过三氧化二铝柱净化提取液，再用60℃水浴锅浓缩至尽干，用丙酮溶解并定容至100μl。

1.4.3.3 血液及在各脏器中毒鼠强的测定及定量分析

取样品提取溶液1μl，在上述GC/MS条件下进行分析，并测量气离子质谱峰面积，根据已建立的离子色谱峰面积与毒鼠强浓度间的标准曲线测定各组织器官的毒鼠强浓度，计算出不同中毒浓度死亡大鼠的毒鼠强各脏器含量的平均值。