第二节 鱼病诊断的一般方法
鱼病发生后是否能尽快地得到控制,对鱼病迅速地做出正确的诊断是首要步骤。只有先确定鱼所患疾病,才能对症下药,取得好的治疗效果。诊断鱼病应从以下两个方面进行。
一、现场调查
1.了解鱼出现的各种异常现象
鱼生病后,会表现出各种异常现象,如在水面悬浮、离群独游、摄食量突然急剧下降等。发生急性型鱼病时,病鱼一般在体色、外观和体质上与正常鱼差别不大,仅病变部位稍有变化,但一经出现死亡,死亡率会急剧上升;而发生慢性型鱼病,则往往体质消瘦、活动缓慢、体色发黑、离群独游,死亡率一般呈缓慢上升趋势。
鱼类受到寄生虫侵袭时,往往出现焦躁不安。如鱼鲺侵袭,鱼的体色变化不大,但鱼出现上蹿下跳,阵性狂游;当鲢碘泡虫侵袭鲢鱼时,鱼的尾部上翘露出水面,在水中狂游乱窜打圈子。因农药或工业污水排放造成鱼类中毒时,鱼会出现跳跃和冲撞现象,一般在较短时间内就出现麻痹甚至死亡。由寄生虫引起的死亡,一般是缓慢地逐渐增加,除集约化养殖发现指环虫、三代虫的侵袭在短期内造成大批死亡外,池塘养鱼死亡率一般不会太大;可是若遇鱼类中毒,则往往在极短的时间内,出现大批鱼类死亡,而且不分品种,“四大家鱼”、野杂鱼、泥鳅都会毫不例外地死亡。因此,及时到现场观察鱼的活动情况对于鱼病的及时诊断和处理具有至关重要的意义。
典型案例
泰安某小型水库1.25万千克商品鱼3天内全部死亡。据调查,该水库放养个体规格100克的鱼种达400千克/亩,经4个多月的养殖,个体规格已达0.5千克以上,粗算起来该小水库成鱼密度可达1200千克/亩以上;在养殖过程中,又经常投放未经发酵的厩肥,在雨季时连续几天的连绵阴雨,又无增氧和注水设备,最终导致第一天鲢鱼陆续出现成批死亡,第二天草鱼和鲤鱼也开始出现批量死亡,下午鲫鱼也有死亡现象,至第三天晚间,水库中鱼已死亡90%以上。通过综合调查分析,基本可诊断为缺氧泛池死亡。
调查中,还应注意病鱼是陆续少量死亡,还是死亡有明显的高峰期,前者应考虑是寄生虫侵袭的可能,而后者可能是传染性鱼病。
2.了解水质和环境情况
1)水温与鱼病的流行有密切的关系,各种病原体都有其繁育生长的最佳温度范围。很多致病菌和病毒在平均水温25℃左右时,毒力显著增高,水温降到20℃以下时,则毒力减弱,使病情减弱或停止。斜管虫宜在水温12~18℃时大量繁殖;小瓜虫生长和繁殖的水温,一般在15~25℃,当水温低于10℃以下或高于26℃时,则停止繁殖。观察水的颜色,对水质情况也可进行大致了解。水中腐殖质多时,水呈褐色;水中含钙质多时,呈现天蓝色;微囊藻大量繁殖时,水呈铜绿色;城市排出的生活污水,一般呈黑色;当水质被污染时,因污水种类和性质不同而出现不同的颜色,如红、黑、灰白色等,透明度也会随之大大降低。水中的溶解氧、pH、氯化物、硫化物等与鱼病流行的关系极为密切。有的鱼池数年不清塘,有的网箱长年摆设于一个地方,鱼的粪便和残饵大量沉积,当水底溶氧量减少时,嫌气微生物发酵分解产生硫化氢,不仅容易使鱼类中毒,而且更加剧了溶氧的缺乏,造成鱼类“浮头”或窒息死亡。目前网箱养鱼在寒冷的冬季常发生大批死鱼,多数是因水温高于气温,底层水温高于表层水温,使养殖区域库水上下对流,造成缺氧所至。有机质多而水质发臭的水,一般都适宜鳃霉的大量繁殖,引起鳃霉病的流行;酸性水常引起嗜酸性卵甲藻病的暴发;氯化物和硬度高的水,则会促使小三毛金藻大量繁殖,造成鱼类中毒死亡。
2)了解周围的环境中是否存在污染源或流行病的传播源,鱼池周围的环境卫生,家畜、家禽、螺蚌及其敌害生物在渔场内的数量和活动情况等,特别对一些急剧的大量死鱼现象,尤其需要了解附近农田施药情况和附近厂矿排放污水情况,在工业污水和农药中,尤以酚、重金属盐类、氰化物、酸、碱、有机磷农药、有机氯和有机砷等对鱼类危害较大。一旦确诊为中毒死亡,应迅速了解施药的种类或污水中的主要致死化学成分,以便采取应急措施。
3.了解饲养管理情况
对投饵、施肥、放养密度、放养品种和规格、各种生产操作记录及历年发病情况等都应作详细了解。投喂酸败饲料和腐烂变质的饲料,容易引发鱼的瘦背病和死亡;放养密度过大,鱼摄食量不足,体质差,对疾病的抵抗力弱,也容易引起疾病;施肥量过大,在池中直接沤肥,投饵量过多等,都容易引起水质恶化,造成缺氧,影响鱼的生长,同时给病原体和水蜈蚣等敌害生物创造了条件,导致鱼的大批死亡;水质过瘦,饵料生物缺乏,又容易引起跑马病、萎瘪病的发生;拉网等操作造成鱼体损伤后容易引起白皮病和肤霉病等。
调查中还应了解以前治疗的情况,应详细询问曾用过何种药物,效果如何,这些情况都有助于对鱼病做出正确的诊断。
二、鱼体检查
通过以上的现场调查,只是对与鱼病有关的外部环境有了初步的了解,要对鱼病做出正确的诊断,主要靠对鱼体的检查。检查病鱼时,最好捞取濒临死亡而未死的病鱼进行检查,如果达不到这一要求,也要尽可能地选用刚刚死亡且体色未变、尚未腐败的鱼进行检查(受检鱼至少3~5尾)。需要带回室内检查时,受检鱼应放在盛有水的水桶内。
提示
如果病鱼已死,盛水带回时,可能某些寄生虫就会离开鱼体而影响检查,此时可用湿布或湿纸包裹带回。
1.肉眼检查
肉眼检查是诊断鱼病的主要方法之一,有些鱼病仅通过肉眼就可诊断。由于有些病原体的寄生部位,往往呈现出一定的病理变化,有时症状还很明显,例如,水霉及一些大型的寄生虫(如蠕虫、甲壳动物、体形较大的原生动物等),用肉眼就可识别出来。传染性鱼病常常表现为出血症状;而寄生虫病,常表现出黏液分泌增多、发白、有点状或块状的胞囊等症状。通过肉眼观察其不同的症状,对于某些鱼病就可做出初步的诊断。所以,肉眼检查法是一种较为方便并能收到较好效果的方法。
对患病鱼体进行检查,一般要检查体表、鳃、内脏3部分,检查顺序和方法如下。
(1)体表检查 将病鱼放在解剖盘内,按顺序从病鱼的头部、嘴、眼睛、鳞片、鳍条等部位逐次仔细观察。在体表的一些大型病原体(水霉、锚头鳋、鱼鲺、钩介幼虫等)很容易被看到。但有些肉眼看不见的小型病原体,则需要根据所表现出的症状来判断,如车轮虫、鱼波豆虫、斜管虫、三代虫等,一般会引起鱼体分泌大量黏液,或者头、嘴及鳍条末端腐烂,但鳍条基部一般无充血现象;如有角膜混浊,有白内障时,很可能是复口吸虫病;草鱼赤皮病,则鳞片脱落,局部出血发红;鲢鱼打印病,在鱼腹部两侧或一侧有圆形红色腐烂斑块,像盖过的印章;如果草鱼鱼体发黑,背部肌肉发红,鳍基充血,肛门红肿,剥皮可见肌肉出血,可能是患有病毒性出血病或肠炎病。
(2)鳃部检查 鳃部检查的重点是鳃丝。首先注意鳃盖是否肿胀,鳃盖表皮有没有腐烂或变成透明现象;然后用剪刀将鳃盖除去,检查鳃丝是否正常。如鳃丝腐烂发白带黄色,尖端软骨外露,并沾有污泥和黏液,多为烂鳃病;鳃丝末端挂着似蝇蛆一样的白色小虫,常常是寄生了中华鳋;鳃部分泌大量的黏液,则可能是患有鳃隐鞭虫、鱼波豆虫、车轮虫、斜管虫、三代虫、指环虫等寄生虫病;鳃片颜色比正常的鱼较白,并略带红色小点,多为鳃霉病。
(3)内脏检查 内脏检查的内容很多,要认真做好记录。将病鱼放在解剖盘内,用剪刀或手术刀将一侧鱼鳞去掉一些,在去鳞处剪开皮肤,剥去一部分皮肤,看皮肤是否变为红色;再从肛门处下剪,一路向上剪至体腔背部,再转向前剪,一直剪至鳃盖后缘,另一路沿腹中线向前剪,至鳃盖后下缘,最后将这一侧皮肤整个去除,露出内脏器官。先观察腹内是否有腹水,腹水的颜色如何,有无肉眼可见的寄生虫,如鱼怪、线虫、舌状绦虫、长棘吻虫等。然后仔细地将体内各器官用剪刀分开,分别仔细观察各器官有无患病症状。
1)肝胰脏:是否肿胀,是否有变色,是否呈花斑状,是否有白点,是否有脓包或结疖等。
2)胆囊:是否肿大,是否颜色变浅,是否胆汁变稀薄。
3)肾脏:是否肿胀,是否有变色,是否呈花斑状,是否有脓包或结疖等。
4)脾脏:是否肿胀,是否有变色,是否呈花斑状,是否有出血点,是否有脓包或结疖等。
5)心脏:是否肿胀,是否有出血点或出血斑等。
6)肠道:取出肠道,从前肠至后肠剪开,分成前、中、后3段,放在解剖盘中,轻轻把肠道中的食物和粪便去掉,然后进行观察。如发现肠道全部或部分出血呈紫红色,则可能为肠炎病或出血病;前肠壁增厚,肠内壁有散在的小白点或成片状物,可能是黏孢子虫病或球虫病。在肠内寄生的较大的寄生虫,如吸虫、绦虫、线虫等都容易被看到。
目检主要以症状为主,要注意各种疾病不同的临床症状,一种疾病在临床上通常有几种不同的症状,如肠炎病,有鳍基部充血、蛀鳍、肛门红肿、肠壁充血等症状;同一种症状,几种疾病均可以出现,如细菌性赤皮、烂鳃、肠炎等病,均能出现体色发黑、鳍基部充血等症状。因此,目检时要认真检查,全面分析,抓住典型症状进行综合判断。
2.显微镜检查(镜检)
肉眼检查主要是以症状为依据,如果同一尾鱼体并发两种以上的症状,就很难确定鱼患何病。还有的症状好几种鱼病都存在,如体色变黑、蛀鳍、烂尾、鳞片脱落、鳃丝分泌黏液增多等症状均在多种鱼病中出现。在这种情况下,仅靠肉眼检查是不能确诊的,必须进一步用显微镜检查,方可做出进一步的诊断。
(1)镜检的注意事项
1)用活的或刚死亡的病体检查。
2)保持湿润。待检病体如体表干燥,则寄生虫和细菌会死亡,症状也会模糊不清。
3)检查工具要清洁卫生。
4)海水动物的检查需用清洁的海水或生理盐水,淡水动物的检查需用清洁的淡水或生理盐水。
5)一时无法确定病原体的,要妥善保留好标本。
6)保持脏器完好。打开体腔后,要保持内脏器官的完好无损,有利于观察病灶部位。
(2)检查方法
1)玻片压展法:取被检动物器官或组织的一小部分,或一滴黏液或一滴肠内容物等,置于载玻片上,滴少许清水或生理盐水,用另一载玻片压平,然后置低倍显微镜下观察,辨认病原体。检查后用镊子或解剖针或微吸管取出寄生虫的可疑组织,分别放入盛有清水或生理盐水的培养皿中,以待作进一步的处理。
2)载玻片法:此法适用于低倍或高倍显微镜检查。取要检查的小块组织或一小滴内含物置于载玻片上,滴入少许清水或生理盐水,盖上盖玻片,轻轻压平(避免产生空气泡),先置于低倍镜下检查,寻找目标,然后再用高倍镜观察,以确定病原体。如果是细菌引起的疾病,制片时还要染色。
镜检一般先要用目检来确定病变部位,然后再用显微镜作细微的全面检查。镜检的重点同样是鱼的鳃丝、体表、内脏等病变部位。但由于镜检只能检查很小的部分组织,为了避免遗漏,每一个病变部位至少要制3个片子,检查不同点的组织。
(3)检查项目
1)黏液:在鱼的体表黏液中,除了肉眼可见的较大型的寄生虫和病征外,往往有许多肉眼看不见的病原体,如颤动隐鞭虫、鱼波豆虫、车轮虫及吸虫囊蚴等,黏孢子虫和小瓜虫的胞囊肉眼也不易区分。在检查时,先用解剖刀刮取鱼体表的黏液,然后按照镜检方法将黏液放到显微镜下观察。
2)鼻腔:用镊子或微吸管从鼻腔内取少许内含物,置显微镜下检查,可发现黏孢子虫、车轮虫等原生动物。然后用吸管吸取少许清水注入鼻孔中,再将液体吸出,置于培养皿中,用低倍显微镜观察,可发现指环虫、鳋类等。
3)血液:从鳃动脉或心脏取血。如从鳃动脉取血,先剪去一侧鳃盖,然后左手用镊子将鳃瓣掀起,右手用微吸管插入鳃动脉或腹大动脉吸取血液。吸起的少许血液可直接放在载玻片上,盖上盖玻片,在显微镜下检查;吸起较多的血液,可放入培养皿内,然后再取一小滴制成玻片,在显微镜下检查。如从心脏取血,先除去鱼体腹面两侧鳃盖之间最狭处的鳞片,再用尖的微吸管插入心脏,吸取血液。血液镜检可发现锥体虫、拟锥体虫等原生动物。培养皿内的血液用生理盐水稀释后,在显微镜下检查,可发现线虫和血居吸虫。
4)鳃:可先用剪刀剪取一小片鳃组织,放在载玻片上,滴入适量的清水,盖上盖玻片在显微镜下观察;然后刮取鳃片上的黏液或可疑物,同样按上述方法进行检查。鱼的鳃是特别容易被病原体侵袭寄生的部位,鳃隐鞭虫、黏孢子虫、微孢子虫、肤孢虫、车轮虫、斜管虫、小瓜虫、半眉虫、舌杯虫、毛管虫等原生动物,指环虫、三代虫、双身虫等单殖吸虫,复殖吸虫囊蚴,软体动物的幼虫及鳋类等,在鳃上往往都会寄生。为了检查的准确性,每边的鳃至少要检查2片以上,取鳃组织时,最好从每一边鳃的第一片鳃片接近两端的位置剪取一小块,寄生虫大多在鳃片的这两个位置上有寄生。
5)体腔:打开体腔,发现有白点,用显微镜检查,可发现黏孢子虫、微孢子虫、绦虫等成虫和囊蚴。
6)脂肪组织:脂肪组织如发现白点,压片镜检,可发现黏孢子虫。
7)胃肠:首先应把肠道外壁上所有的脂肪组织尽量去除干净,不然在检查时,脂肪进入肠道内的检查物,会妨碍观察。脂肪去除后,一般是先进行肉眼检查,观察肠道外形是否正常,若肠道外壁上有许多小白点,通常是黏孢子虫或微孢子虫的胞囊;肉眼检查完后,一般是将肠道分为前肠、中肠和后肠3段,分别进行检查。胃肠道也是最容易受细菌和寄生虫侵袭的地方。除了引起肠炎的细菌外,其他很多寄生虫如鞭毛虫、变形虫、黏孢子虫、微孢子虫、球虫等原生动物及复殖吸虫、线虫、棘头虫、绦虫等都可经常发现,有时数量还相当大。复殖吸虫、绦虫、线虫和棘头虫,通常寄生在前肠(胃)或中肠;六鞭毛虫、变形虫、肠袋虫等,一般寄生在后肠近肛门3~6厘米的地方。
检查时除了注意发现较大型的寄生虫和在肠液中生活的寄生虫外,还应注意肠内壁上有无白色点状物或瘤状物,有无溃烂、发红、发紫、出血等现象。如果有小白点,压破其胞囊,往往可以看到大量的黏孢子虫,有时也会是微孢子虫。青鱼肠里溃烂或有白色瘤状物,往往是球虫的大量寄生;如果发红、发紫、出血等,则一般是细菌性肠炎。
8)肝脏:同样先用肉眼观察,注意肝脏的颜色与正常鱼有无明显变化,有无溃烂、病变、发白和肿瘤等。在肝脏的表面,有时可发现复殖吸虫的胞囊或虫体,有的则有黏孢子虫、微孢子虫或球虫形成的胞囊的小白点。将外表观察完后,从肝脏上取少许组织,放在载玻片上,盖上盖玻片,轻轻压平,先在低倍镜下观察,然后再用高倍镜观察,通常在病鱼肝脏上可发现黏孢子虫、微孢子虫等的孢子或胞囊,有时还有吸虫的囊蚴。
9)脾脏:镜检脾脏少许组织,往往可发现黏孢子虫或胞囊,有时可发现吸虫的囊蚴。
10)胆囊:胆囊壁和胆汁,除用载玻片法在显微镜下检查外,还要用压展法或放在培养皿里用低倍显微镜检查。胆囊内可发现六鞭毛虫、黏孢子虫、微孢子虫、复殖吸虫和绦虫幼虫等。
11)心脏:取一滴内含物,在显微镜下检查,可发现锥体虫、拟锥体虫和黏孢子虫。
12)鳔:用载玻片法和压片法同时检查,可发现复殖吸虫、线虫、黏孢子虫及其胞囊。
13)肾脏:取肾脏应当完整,如肾脏很大,则分前、中、后3段分别检查,可发现黏孢子虫、球虫、微孢子虫、复殖吸虫和线虫等。
14)膀胱:用载玻片法和压展法同时检查,可发现六鞭毛虫、黏孢子虫和复殖吸虫等。
15)性腺:取左右性腺,先用肉眼观察外表,常可发现黏孢子虫、微孢子虫、复殖吸虫囊蚴、绦虫的双槽蚴和线虫等。
16)眼:用弯头镊取出眼睛,放于玻片上,剖开巩膜,释出玻璃体和水晶体,在低倍显微镜下检查,可发现吸虫的幼虫和黏孢子虫。
17)脑:取脑组织少许,镜检可发现黏孢子虫和复殖吸虫的胞囊或尾蚴。
18)脊髓:把头部与躯干部交接处的脊椎骨剪断,再把尾部与躯干部交接处的脊椎骨也剪断,用镊子从前端的断口插入脊髓腔,把脊髓夹住,慢慢将其整条拉出来,分前、中、后3段检查,可发现复殖吸虫的幼虫和黏孢子虫。
19)肌肉:剥去皮肤,分前、中、后取小片肌肉组织,用玻片法和压展法检查,可发现黏孢子虫、复殖吸虫、绦虫和线虫等幼虫。
镜检的准确率取决于制片的技巧、显微镜的使用和对各种病原体外部特征的识别。制片厚薄要适当,先用低倍镜找到病原体,然后再用高倍镜仔细观察,以识别病原体的类型。如在检查中发现某种寄生虫大量寄生,可确定为某种疾病;如有几种寄生虫同时寄生,可根据虫体数量和危害程度的不同来诊断。同时,还要根据病鱼的症状和水体环境等因素,进行比较和分析,找出主要病原体和次要病原体。常见鱼类寄生虫检查方法见表1-2。
表1-2 常见鱼类寄生虫检查方法