第四节　寄生虫感染性疾病的实验诊断方法

寄生虫病的流行具有地方性、季节性和自然疫源性的特点，各种寄生虫又有各自的寄生生活史，入侵人体的门户、移行的路线和寄居的部位各有不同，致病特点也不一致。因此必须根据临床资料和流行病学情况确定病原检验方法。

一、病原检验

雌蛲虫可在夜间从肛门爬出并在肛门周围产卵，可在夜间儿童熟睡后，使其侧卧，暴露肛门仔细检查，若发现白色线头样小虫，用镊子夹住放入装有70%乙醇的小瓶中。也可以在清晨排便前，用透明胶带纸粘贴肛门周围，检查蛲虫卵。某些带绦虫孕节可从肛门逸出，并有虫卵污染肛门周围，也可用此法或棉拭子法拭擦肛门周围检查虫卵。

每天或隔天早晨收集新鲜粪便标本，连续3次送检。适用于蠕虫卵、原虫滋养体的检查。也可适用饱和盐水法收集虫卵，提高检出阳性率。

钩虫卵在适宜温、湿度和氧气充足的情况下很快发育并孵出幼虫，可在显微镜下观察。检出率高于粪便直接涂片法和饱和盐水法。可鉴别虫种并为研究各种药物对钩虫的驱虫效果、指导治疗提供依据。成熟日本血吸虫卵内毛蚴在25～30℃、pH 7.5～7.8及一定光线下，在清水中孵化4～6小时，可观察到孵出的毛蚴，检出的阳性率高于粪便检查虫卵的各种方法。

肠道寄生的蠕虫有时能自然排出，或服用驱虫药后随粪便排出，可通过显微镜进行检查。也可通过染色后检查。

痰液中能查见肺吸虫卵、溶组织内阿米巴滋养体、棘球蚴的原头蚴、蛔蚴、钩蚴等，有时也可查见卡氏肺孢子菌的包囊。

用于检查十二指肠和肝胆系统内寄生的如蓝氏贾第鞭毛虫、华支睾吸虫卵等，以及蛔虫卵、姜片虫卵、粪类圆线虫成虫和幼虫。在急性阿米巴性肝脓肿患者可发现溶组织内阿米巴大滋养体。

主要用于班氏丝虫微丝蚴的检查。

主要用于阴道毛滴虫的检查。标本必须新鲜送检，并放入生理盐水中。

对典型发作的间日疟及三日疟，在发作后数小时至十余小时采血液标本较好，此时红细胞中的疟原虫已发育至环状体或晚期滋养体，疟色素已形成，虫体较大，易于观察。恶性疟原虫的环状体随时能从血液中检出，因此在发作时采集血液标本即可。采集时通常用针刺指头或耳垂部位，血液在玻片上制作圆形、椭圆形厚血膜。或推成舌状薄血膜。厚血膜片阳性率高。如无把握制作血片，可抽取静脉血或末梢血用EDTA抗凝，1小时内送到检验科。

由于班氏丝虫和马来丝虫有夜现周期性的特点，故在夜间9点至凌晨2点采取血液。采血方法与疟原虫相同。采用鲜血片法、厚血片法直接在显微镜下查找。也可以采取2ml抗凝静脉血，用离心浓集方法检查。

主要检查杜氏利什曼原虫。

直接涂片法主要用于检查溶组织内阿米巴、肺吸虫虫卵、棘球蚴等，也可检到广州管圆线虫、血吸虫卵、弓形虫滋养体和粪类圆线虫幼虫等，但检出率低。

用穿刺或活检的方法取得淋巴结组织。可检查丝虫的成虫或已钙化的丝虫结节。穿刺液涂片或组织切片可查见杜氏利什曼原虫和弓形虫滋养体。

切取米粒大小的肌肉组织1块，作压片观察，或将肌肉组织剪碎、消化后取沉渣观察。用于旋毛虫病或囊虫病的检查。

从直肠病变部位取米粒大小直肠黏膜1块，作压片检查，可直接或染色后检查血吸虫虫卵。用刮勺刮取病变处边缘或深层病变组织，制成生理盐水涂片或压片检查，可查见溶组织内阿米巴大滋养体等。

通过穿刺或手术取肝、肺组织，作涂片、压片或切片检查。肝组织可查见血吸虫虫卵、杜氏利什曼原虫、溶组织内阿米巴大滋养体等。肺组织中可查见肺吸虫成虫、卡氏肺孢子菌、溶组织内阿米巴大滋养体及棘球蚴等。

二、免疫学检验

寄生虫的抗原组成复杂，其中寄生虫活虫释放到血液循环中的各种大分子物质，称为循环抗原。常用于诊断寄生虫的现症患者和判断疗效的指标。此外寄生虫的虫体抗原、表面抗原及代谢抗原也有诊断的意义。常用的方法有：

用寄生虫的粗制可溶性抗原或成虫冷浸抗原，注入可疑患者皮内，根据速发性变态反应的情况进行判断。适用于血吸虫病、肺吸虫病等，阳性率为93%～97%，假阳性率为2.1%～3.5%。

活的弓形虫速殖子对碱性亚甲蓝有较强的亲和力被染成蓝色，但特异性抗体和辅助因子作用于活的弓形虫后，虫体变性，失去对碱性亚甲蓝的亲和力而不着色。将患者血清与活的弓形虫速殖子及辅助因子作用后，用亚甲蓝染色，观察弓形虫的染色情况，50%以上虫体不着色即为阳性。

血吸虫病患者血清中的特异性抗体与血吸虫卵内成熟的毛蚴释放并透出卵壳的抗原物质结合，在虫卵周围形成显微镜下可见的沉淀物为阳性。

旋毛虫患者血清中的特异性抗体与旋毛虫幼虫的分泌物和排泄物结合，在幼虫的体表、口及肛门部位出现折光性的沉淀物为阳性，特异性100%，阳性符合率97.6%～100%。

斑点酶免疫技术和酶联免疫吸附试验测定抗原或抗体，可帮助诊断。其他如免疫荧光技术、免疫发光技术、放射免疫技术、补体结合试验等均应用于抗原或抗体的测定。

（李向阳）