红细胞是临床输血最常用的血液成分。红细胞制品的种类很多，目前主要的红细胞制品包括悬浮红细胞、浓缩红细胞、去白细胞红细胞、洗涤红细胞、年轻红细胞、冷冻解冻去甘油红细胞和辐照红细胞等。

各种红细胞的制备一般是采集全血于多联塑料采血袋中，利用重力离心法分离制备而获得。如果临床有特殊需要也可以通过血细胞分离机单采红细胞。本节描述用采集的全血制备各种红细胞的方法。

悬浮红细胞制备的方法有手工法及仪器（血液成分分离机）法，在制备悬浮红细胞的过程中也同时制备液体血浆产品。

分浆架、分浆夹、天平或电子秤、塑料夹、止血钳、大容量冷冻离心机（有条件的可配备全自动血液成分分离机）。

用塑料血袋（多联袋）采集的全血。

1.接收原料全血。

2.信息录入和选择分离方案。

3.血液离心

（1）装有全血的血袋规整装入离心内杯，加入塑料软片利用天平配平；将对应的离心内杯对称放入已预冷［温度（4±2）℃］的大容量冰冻离心机对称位的离心杯中，外露过多的联袋或塑料管道要放入离心内杯，不要超过离心内杯提柄的高度；盖上内盖、外盖并压到底。

（2）重离心：离心力4303g，时间10～12分钟（200ml/袋全血离心10分钟，400ml/袋全血离心12分钟）；启动离心机离心。

（3）离心完成后，从离心机中轻轻取出离心内杯，并从离心杯中取出血袋，避免震动，观察离心效果、血袋及导管有无渗漏、离心杯中有无血迹；如有破损应查找渗漏点，血袋破漏的，应做好消毒和报废处理，并填写《成分制备破袋原始记录》。

4.分离红细胞和血浆

（1）离心后将血液轻轻取出置于分浆夹中，红细胞保存液袋挂于分浆架上层。

（2）目视检查血袋条码是否一致，血浆和红细胞分层是否清楚，是否有溶血、气泡、重度乳糜、色泽异常，血袋和管道是否完好。

（3）折断红细胞袋阻塞管，轻轻挤压将采血袋上层血浆引入转移空血袋，利用虹吸原理分离血浆；将血浆袋放在电子秤上，达到设定重量，血浆液面距红细胞平面约1cm即用止血钳夹住血浆袋转移管或关闭夹子。

重度乳糜血浆尽量排尽，红细胞套好包装袋，并注明“重度乳糜血留作洗涤”及日期，血浆报废。

5.收取悬浮红细胞及液体血浆

（1）加入红细胞保存液：把红细胞袋从分浆夹内取下松开止血钳或夹子，折断红细胞保存液阻塞管，让红细胞保存液流入红细胞袋内。保存液流尽后，轻轻将红细胞与保存液混匀，即为悬浮红细胞。

（2）排净血浆袋内的空气，使血浆袋管道内充满血浆；应避免残留的红细胞流入成品血浆中。

（3）将成分分离后的红细胞袋热合分离，分别获得1袋悬浮红细胞和1袋液体血浆产品。

6.处理血浆袋

（1）如血浆袋中红细胞混入量少（目视观察）即可将血浆袋热合断离。

（2）如血浆袋内红细胞混入量较多，颜色偏红则需要二次离心，然后将二次离心好的血浆袋挂于分浆架，小心去除塑料夹，让血浆流入空袋内，排气，血浆袋管道内充满血浆；用止血钳钳住残留红细胞的废袋管道末端或关闭夹子（二次离心血浆颜色异常未达到报废的，做好“二次离心”标识）。

（3）如欲用制备的新鲜血浆制备冷沉淀，则不热合断离血浆袋。

7.血液成品容量范围　手工法制备的悬浮红细胞和液体血浆的容量见表4-2。

8.热合导管。

9.信息录入。

10.血浆速冻。

11.血液成分移交，待检库保存

（1）成分制备组工作人员双人核对血液的数量、品种、血型等无误后，先将血液放置待检冰箱保存后，由待检组通过计算机管理信息系统完成交接记录。

（2）悬浮红细胞直立放置于塑料筐，双人核对无误后，转至（4±2）℃冰箱内保存。

（3）血浆平放入塑料筐内，转至-20℃低温冰柜内保存。

（4）不合格血液的处理：执行不合格血液控制程序，并按规程进行报废，移交待检组处置。

以LMB-SEPAMATIC-SL全自动血液成分分离机为例进行介绍。

1.开机　首先打开空气压缩机电源开关，压缩机自动启动；然后打开设备背部的电源开关，按红色键开启设备；启动设备后，请等待，直到显示屏出现初始化提示；确保设备上没有任何血袋或导管后，点击确定进入设备初始化。（注意：确定所有的自检项目都通过才能使用设备，否则重新自检）

2.将离心后的血液轻轻取出，避免振荡，依次将母袋，红细胞保养液袋及转移袋挂入相应的挂杆上，并确保所有导管完全卡入相应的卡钳内。（注意：母袋标签朝外挂放，血浆袋位置导管保持宽松，防止在流入血浆时导管拉扯称重装置影响定量准确性）

3.点击屏幕上的“程序”键，进入程序选择界面后，选择相应的血液分离程序；折断母袋及红细胞保养液袋上的易折二通。

4.点击屏幕上的“开始”键，用扫描枪依次扫描操作人员工号条形码、产品条形码及献血条形码，并按屏幕提示，点击“下一步”进行操作。

操作时注意事项：

（1）程序开始时，手指不要接触挤压板，避免挤伤手指。

（2）程序执行过程中不要触碰血浆袋位置，防止误操作。

5.程序结束时，先将导管上所有卡夹夹闭，再根据提示进行导管热合，如不需要热合导管，按“完成”打开卡钳；在热合两个以上导管时不要同时多次重复点击“热合”，操作时需等待设备自动执行热合完毕。

6.热合完成，将出现称重界面；在称重界面先将母袋外移使血袋悬空（保证数据存储精确性）；点击“确定”，完成操作；取出各部位血袋，程序执行完毕。

7.与红细胞分离后的血浆进行目视检查，有严重乳糜，血浆溶血应拣出与其他血浆隔离，并进行不合格品标识；合格血浆称重制作成各种规格（0. 5U、1U、1. 5U、2U、2. 5U）的血浆；对于混入红细胞较多的血浆需进行二次离心。

8.需二次离心的血浆平衡后置于离心机内，离心参数为：离心力3690g，时间8分钟，温度（4±2）℃；离心完成后目视检查有无标签脱落、渗漏；如发现破损应查找渗漏点；血浆袋破漏的血浆，应做好消毒和报废处理，并填写成分制备破袋原始记录。

9.将二次离心后的血浆及空转移带置于成分分离机上，血浆袋及导管置于A卡钳及相应的挂杆上，空转移袋及导管置于D卡钳及相应的挂杆上。

10.点击屏幕上的“程序”键，进入程序选择界面后，选择“新浆”血液分离程序，打开卡夹。

11.点击屏幕上的“开始”，用扫描枪依次扫描操作人员工号条形码、产品条形码及献血条形码，并按屏幕提示，点击“下一步”进行操作。

12.程序结束时，根据提示进行导管热合，如不需要热合导管，按“完成”打开卡钳；热合完成，将出现称重界面；在称重界面先将母袋外移使血袋悬空（保证数据存储精确性）；点击“确定”，完成操作；取出各部位血袋，程序执行完毕。称重制作成各种规格（0. 5U、1U、1. 5U、2U）的血浆。

在有效保存期内的全血经过离心，分离出大部分血浆，剩余血液成分即为浓缩红细胞（具体制备过程参见悬浮红细胞的制备）。一般推荐用三联袋或四联袋采集的全血分离、制备浓缩红细胞。浓缩红细胞已基本被悬浮红细胞取代，临床已很少使用。

详见本章第五节去白细胞血液制备。

洗涤红细胞是通过使用大量等渗溶液反复洗涤红细胞，离心去掉上清液，使红细胞中残留的血浆蛋白含量显著降低，从而预防输血过敏反应。在洗涤去血浆蛋白的同时，可以使白细胞和血小板残留量降低。洗涤方法有手工联袋洗涤法和全自动细胞洗涤机洗涤法。

1.设备、材料　红细胞悬液、四联洗涤袋、分浆夹、天平、塑料夹、止血钳、无菌接管机、离心机等。

2.待用四联洗涤生理盐水袋提前放置冷藏保存，检查有无破损渗漏、霉点和有效期。

3.检查红细胞悬液　合格、无破损渗漏，血液外观正常，在有效期内。

4.用计算机扫描、核对血液血型、血量、数量是否与制备计划相符，无误后签收。

5.使用无菌接管机将红细胞悬液袋导管与盐水联袋导管进行无菌接合连通。

6.把第1袋盐水移至红细胞袋内，液体量约为每单位100ml，袋口管道上塑料夹，摇匀。

7.离心　5个袋子分别装于2个离心套桶中（一侧为血袋与第1袋，另一侧为3个盐水袋）平衡后，对称放入离心机内，在（4±2）℃以4500g的离心力离心3分钟。

8.第1次离心后，血袋置分浆夹上，去塑料夹，上清液与白膜层挤入第1空袋后，把第2袋盐水移至红细胞袋，管道上塑料夹，摇匀。

9.重复6、7、8三个步骤，依次洗涤3次后，转移管上止血钳。

10.将适量血液保存液（生理盐水或红细胞保存液）移入已完成洗涤的红细胞袋中称重（表4-3），摇匀。

11.热合导管。

12.信息录入。

13.移交待检组签收入库后，打印标签后送交供血科；最后以生理盐水混悬的洗涤红细胞保存期为24小时，以红细胞保存液混悬的洗涤红细胞保存期与洗涤前的红细胞悬液相同。

1.保存期内的悬浮红细胞、浓缩红细胞或全血均可以用作洗涤红细胞的原料细胞，在洗涤前从冰箱内取出置室温30～60分钟。

2.将三联袋盐水袋主袋与红细胞袋进行无菌接合连通；把主袋内200ml盐水加入红细胞袋内，充分混匀后，倒流入三联袋主袋内。

3.离心　4个袋子分别装于2个离心杯中（一侧为血袋与空袋，另一侧为两个盐水袋）平衡后，对称放入离心机内，在（4±2）℃以4500g的离心力离心3分钟。

4.分离　离心后将装有血液的血袋悬挂于支架上，把上清和白膜分入空袋内，热合切断与废液袋的导管，移除废液袋。

5.重复2、3、4步骤，依次洗涤红细胞3次。

6.洗涤红细胞在三联袋的末袋内，将与末袋相连的塑料管内充满红细胞。

7.分段热合留样本。

8.信息录入。

详见下文“六”中“冰冻解冻去甘油红细胞制备”部分。

年轻红细胞是20世纪80年代国外研究出的新的红细胞制品，是一种具有较多的网织红细胞、酶活性相对增高、细胞年龄较小的红细胞成分。年轻红细胞主要由网织红细胞和年龄较轻的红细胞组成，平均年龄为（30±10）天。大多用血细胞分离机制备。手工制备方法有两种。

采集2U全血，离心，离心力可选择1670g、1960g、2280g三种，分别离心5分钟；将离心后的主袋放入特制挤压板上，先分出上层血浆，再分离红细胞袋上层约100g的红细胞至转移袋，即可获得2U年轻红细胞。

采集2U全血，于24小时内分离；将全血于3000rpm离心10分钟，分出上层200ml血浆，其余部分充分混匀，移入长形无菌空袋，并置于离心杯内以3500rpm离心30分钟；用分离钳将红细胞层上部45%和底部55%分开，将上部的红细胞与白膜和部分血浆混匀，移入另一无菌空袋即为2U年轻红细胞。

冰冻红细胞制备及解冻包括红细胞甘油化、冰冻保存和解冻洗涤去甘油三个过程。目前冰冻红细胞常用的冰冻保护剂为甘油。将红细胞与甘油充分混合均匀（甘油化），置于-80～-65℃低温冰箱或-196℃液氮中保存，需要使用时取出，解冻复苏，洗涤去除甘油，再用生理盐水悬浮，得到解冻去甘油红细胞。

冰冻红细胞的制备及保存应在采血后6天内进行。

全自动血细胞处理仪、无菌接管机、水浴箱、速冻机；加甘油耗材、800ml冻存袋、57%甘油（160ml/1U、240ml/1. 5U、320ml/2U）红细胞保存纸盒、转移空袋、悬浮红细胞。

（1）核对拟冰冻保存的悬浮红细胞血型、血量、数量与制备计划是否相符，无误后签收。

（2）检查转移袋、冰冻袋的有效期和有无破损，霉点等。

（3）制备浓缩红细胞：无菌接合悬浮红细胞血袋和转移空袋，离心（离心力2495g，5分钟，4℃），分去上清液（如果以检验合格的全血为起始血液原料，参照本节“浓缩红细胞制备”）。

（4）热合分离红细胞袋和转移袋。

（5）无菌接合红细胞袋和800ml冻存袋，将红细胞转移至冻存袋内；同时转移献血码，热合弃掉原红细胞袋。

（6）加甘油

1）仪器法加甘油（按ACP215全自动血细胞处理仪手册操作）：①检查要使用的加甘油耗材包装是否有裂缝或漏洞，拆开单包装，检查是否有管路扭转、部件缺损等影响正常操作的情况；②无菌接合冻存袋和加甘油耗材导管。

2）甘油化：①打开全自动血细胞处理仪电源、开机自检，开启离心机，选择加甘油程序；②安装加甘油耗材并确认后连接甘油袋（1U红细胞使用160ml甘油，1. 5U红细胞使用240ml甘油，2U红细胞连接使用320ml甘油），预冲甘油入滴壶，安装完毕后按“YES”键；③红细胞冻存袋固定在设备的摇床平台上，放开无菌接合的管路，穿刺57%甘油袋；④设置红细胞重量及甘油标准量参数：设定lU红细胞重量130g，甘油标准量160ml；1. 5U红细胞重量为140g，甘油标准量240ml；2U红细胞重量为185g，甘油标准量320ml；⑤运行：确认无误，确保管路所有夹子打开后按“START”键开始自动运行。（运行时，程序参数不能再修改），屏幕相继显示：PRIMING、DISPOSABLE、SET…（预冲耗材…）、GLYCEROLIZATION IN PROGRESS…（加甘油进行中…）、MIXING GLYCEROLIZED BLOOD…（混匀加甘油的血液…）、GLYCEROLIZATION COMPLETE（加甘油结束）等程序。当屏幕显示真实数值与设定数值一致时，加甘油自动停止；⑥加甘油结束，拆卸管路。

3）手工法加甘油：无菌接合冰冻袋与输血器及57%甘油袋，以4ml/min的速度缓慢滴加甘油液（每单位红细胞160ml）至红细胞冰冻袋内，加甘油时需先慢后快，15分钟左右加完，并不断振荡，振荡频率以50～60次/分钟为宜。

（7）制备信息录入。

（8）速冻保存：将冰冻红细胞袋室温静置30分钟后，贴标签，速冻成型、置-80～-65℃以下保存。

全自动血细胞处理仪、无菌接管机、水浴箱。冰冻甘油保存红细胞、去甘油耗材、9%浓氯化钠溶液（80ml/1U、160ml/1. 5U、160ml/2U）、0. 9%氯化钠溶液1000ml、羟乙基淀粉40氯化钠溶液500ml/1U、空白血袋等。

（1）接收供血科送交的冰冻红细胞，核对进一步加工出库单与实物是否相符并确认签收。

（2）将冰冻红细胞放入37～40℃水浴箱中摇动快速融化，直至完成解冻（5分钟内）；在冰冻红细胞袋右上角标明容量；红细胞解冻时，一次制备一袋，其余放置在-25℃以下保存。

（3）去甘油：有仪器法及手工法。

1）仪器法去甘油：以ACP215全自动血细胞处理仪为例。

A.检查使用的耗材是否完好、在有效期、有无霉点等。去甘油耗材包装是否有裂缝或漏洞，拆开单包装，肉眼检查是否有管路扭转、部件缺损等。

B.关闭耗材上的所有活动夹，无菌接合冰冻红细胞袋与去甘油耗材的红色管路。

C.去甘油，具体操作见《APC215全自动血细胞处理仪使用手册》。主要步骤：①开机自检，按图示安装耗材连接各种管路。②红细胞成品袋悬挂，离心杯安装后关闭锁定离心机盖；管路转入泵内；DPM滤器安装。③将各种颜色的管路装入相应颜色的阀门：夹闭橙色管路；黄色为洗涤液（0. 9%生理盐水）管路；蓝色为高渗液（9%浓盐水）管路。④解冻红细胞制剂固定在设备的摇床平台上，按“YES”键，设备耗材完全装妥，6个阀门全部关闭，放开无菌接合管路和耗材上的所有滑动夹。⑤蓝色管路穿刺9%浓氯化钠溶液、黄色管路穿刺羟乙基淀粉40氯化钠溶液、橙色管路夹闭。⑥洗涤去甘油：安装完毕，按“YES”键，按屏幕相继显示的提示操作：确认流出管路、离心杯、保存液是否已拆封、无菌接合的冻融红细胞袋与红色管路接通、红细胞袋置于摇床上固定好等；设置/修改参数，确认无误后按“START”键开始自动运行（运行时，程序参数不能再修改）；经多次生理盐水洗涤结束后，将黄色管路移出，穿刺0. 9%氯化钠溶液作为红细胞保存液。⑦结束程序：程序结束，把所有夹关闭。⑧卸除耗材，转贴献血码至成品袋称重。⑨工作结束后，关闭所有仪器电源。

D.去甘油完毕后，1U去甘油红细胞需用无菌接管机连接空袋，离心后移除多余的上清液（1U = 200ml±20ml +袋重30g）；1. 5U、2U去甘油红细胞（1. 5U = 300ml±30ml，2U = 400ml±40ml）无须此操作。

2）手工法去甘油：以1U冰冻红细胞为例（盐水洗涤法）。

A.无菌接合冰冻红细胞血袋与输血器及80ml 9%氯化钠袋，加入9%氯化钠，水平静置5分钟，热合去掉9%氯化钠袋。

B.无菌接合冰冻红细胞血袋与输血器，用皮肤消毒剂消毒0. 9%氯化钠溶液胶管，无菌插入输血器和排气针；加入0. 9%氯化钠溶液250ml，混匀。

C.离心，移除上清液，热合去掉废液袋。

D.同法加入400ml 0. 9%氯化钠溶液，离心，弃去上层液体，热合去掉废液袋。

E.同法加入0. 9%氯化钠溶液100ml混匀，离心，弃去上层液体，热合去掉废液袋。

F.同法加入0. 9% NaCl溶液100ml，制成冰冻解冻去甘油红细胞。容量标准：1U：200ml±20ml；1. 5U：300ml±30ml；2U：400ml±40ml。

G.热合导管、录入信息。

H.冰冻解冻去甘油红细胞送供血科。