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二、染色
瑞氏-吉姆萨(Wright-Giemsa)混合染色能集合瑞氏染色与吉姆萨染色的优点,故在此推荐使用混染的方法。
商品化的染液分为A液(染液)、B液(缓冲液)。
染色方法:将血片平放在染色架上,滴加A液覆盖整个血膜,30秒~1分钟后,滴加B液。将A、B液混匀,可用手持载玻片轻轻晃动,亦可用洗耳球轻吹液面(图1-14)。A、B液的比例约为1∶(1.5~2)。静置水平位置染色15~30分钟后,将载玻片拿起,轻轻晃动,使染料不再附着于血膜上。把水流调至最小,平持载玻片,与水流方向呈90°,在血膜头部冲入,见染料翻滚,将水流缓慢向尾部移动,随着水流的移动,可看见细小的染料翻滚并且被水流推出载玻片。然后将水流开大,逐渐倾斜载玻片并使载玻片顺至水流中,自血膜头部冲洗。冲洗干净后的血涂片,放置在血片架上将水分自然控干(图1-15),或斜靠等待自然干燥。
图1-14 在血片染色架上染片
图1-15 将血片斜靠自然干燥
如果采用自动血片染色仪,可按照仪器程序进行染色。如果颜色不佳,可调节染色速度或者试剂比例关系;如果是试剂问题,应及时更换新批号染液。