第一章 前言
9.政府、企业及独立实验室使用经合组织等机构制定的测试指南进行化学品的危害性或安全性评价。使用经过验证的检验方法制定的测试指南可以获得人类和动物健康及环境危害性评估的可靠数据。人们已经认识到需要为国际社会制定一个指南，内容纲要包括一般原则、重要的考虑因素、说明性的例子、可能面临的挑战以及在检验方法验证方面取得的试验结果。这份指南是在成员国以及经合组织有关部门建议的基础上由经合组织成员国的代表们起草的。
10.本指南的目的：为新建立或更新的检验方法与当前使用的方法一致性的验证问题提供指导。此指南提供了检验方法验证这个快速变化和发展领域的现况。更多关于经合组织测试指南发展的各个方面的指导原则，详见经合组织化学品检测测试指南的发展指导文件（4）。虽然此指南中所描述的验证原则是以生物学为基础的检验方法，但它们可能同样适用于其他的试验方法。
11.检验方法的验证是建立在科学可靠原则（5）（6）基础上的程序，通过这些原则进一步确认具有特定目的的试验、方法或程序的可靠性和相关性。可靠性是指：在使用相同的标准化方案时，一种试验在不同时间、在实验室内部及实验室间结果再现性的程度。一种检验方法的相关性是指：试验与目标物种产生的效应之间的关系，以及某个具有确定局限性的检验方法对有特定目的的检验是否有用，是否有意义。简而言之，就是指一种试验方法衡量或预测所关注（生物学）效应的准确程度。相关性包括了检验方法的监督管理需要、实用性及局限性等方面的内容。新的及更新的检验方法必须具备可靠性及相关性，即验证。
12.验证的这一套原则，也称为“索尔纳原则”，是经合组织1996年在瑞典索尔纳举行的研讨会上形成的。在这次会议上，与会者一致认为这些原则适用于新的或更新的危害性评估检验方法的验证，无论是体内或体外，或是对人类健康或环境影响的检验（1）。这些原则是：
（1）试验方法应该提供基本原理，包括一项科学需求和官方目的的明确声明。
（2）要确定体内生物作用的试验方法的检测终点与待检测毒性的关系。需要描述方法的局限性，例如代谢能力。
（3）需提供正式详细的方案并在公共领域发布。方案应该足够详细，以保证使用者能够掌握，并且应该包含数据分析方法及判断标准。试验方法和结果最好应在一个独立的同行评议的刊物上发表。另外，试验的结果应经过独立的科学评审。
（4）应该描述试验方法在实验室内部及实验室之间测试结果的变异性、重复性及再现性。应该有具体的数据描述实验室内部及实验室间的变异水平以及随时间所产生的变化。
（5）必须说明试验方法的操作程序，最好对一系列参考化学品进行编码以排除偏倚。
（6）应该对试验方法的性能与现有的相关毒性资料以及有关目标物种的信息进行了评价。
（7）所有支持试验方法验证评估的数据，包括在验证研究中得到的整套数据都必须进行评审。
（8）通常，这些已经获得的数据应与良好实验室操作规范（GLP）的经合组织原则一致。
13.考虑到待开发的试验方法无论在数量上还是类型上一直在持续增加以满足不同用途的需要，因此，验证过程应该灵活，并具有较强的适应性。这些验证原则落实的程度将随着试验方法的目的、性质、以及推荐使用的变化而异。在采用验证原则时应该考虑体内试验与体外试验或间接体内试验之间存在的差异（7）。一般而言，试验方法的测试结果与目的毒理学作用的关系越密切，就越容易建立试验的相关性。检测到的作用与预期作用的一致性越好，试验方法精确描述或模仿对所关注测试物种的作用就越可信（8）。
14.随着时间的推移，毒理学和生态毒理学的检验方法的发展已取得重大的进展。许多毒性和生态毒性试验方法已经常规使用多年，获得并且将继续获得关于化学品毒性的相关信息。管理当局及管理机构接受这些以危害和风险评估为目的的试验方法，不需用当今的验证标准对这些试验方法进行验证。经合组织测试指南大多以这些试验方法为基础。
15.许多关于人类健康潜在危害的替代试验已通过联合验证，这些验证研究是先于国家或国际组织机构［即：机构间替代方法验证协调委员会（ICCVAM）和欧洲替代方法验证中心（ECVAM）］制定的系统协调的验证原则而进行的。这些试验方法，基于它们的使用历史以及业已证明的实用性，而被国际及国家的检验组织和管理当局在危害评估和风险评估中所接受。这些试验方法为管理机构决策提供了充分的科学依据。
16.许多评价人类健康影响试验方法如今已经成为新近发展起来的替代试验方法评估的标准。为了决定试验方法的可靠性，生态毒理学团体已开展验证研究（通常指“环试验”）数十年。他们的焦点已放在试验方案的标准化以及证明它们的普适性和再现性。
17.新的试验方法经过验证以确保它们的使用合乎科学并且满足管理的需要。这些新的试验方法包含了对人类及生态健康的关注、动物福利的考虑、数据质量保证，并整合了新的及改进的技术而得到逐步完善。使用实验动物的毒理学研究和其他物质影响的日益增加的关注，已导致对坚持使用动物的3R原则（9）在开发替代试验方法上的广泛支持。官方当局已批准3R原则。因此替代方法的发展是为了用非动物试验系统代替动物的使用，减少检测中动物的使用数量或是优化实验程序以减少试验中动物的疼痛及紧张程度（10）。
18.随着新试验方法的产生，试验方法的进展及国际上对新方法和更新方法的需要，促进达成国际共识的重要意识已经变得越来越明显，这种意识应该包括大体原则、讨论及新方法验证的相关示例。
19.这份指南提供指导验证研究实施方式和如何证明试验方法业已经过适当的验证。验证研究可以是一个小规模的活动也可以是一个大规模多个国家参与的项目。对验证程序本身的确认性研究，可在经合组织的主持下，由各个成员国、检验方法主办单位及一些不同的组织承担，如一些专门从事替代检验方法验证的运行试验或是已经拥有法律确认的验证机构，包括欧盟的欧洲替代方法验证中心（ECVAM），美国的机构间替代方法验证协调委员会（ICCVAM）和德国的德国动物实验替代方法认证中心（ZEBET）。
20.当一种试验方法经过验证并确定了它的性能（相关性和可靠性）可以接受使用后就可以推荐将其作为经合组织的测试指南。试验方法的主办单位若向经合组织测试指南提议采纳该试验方法，就应该提供该试验方法已经得到充足验证的证据，这些验证是依据国际上公认的原则和标准，例如索尔纳研讨会（1）上所描述的原则。这些标准适用于新的及经过修订的试验方法。官方认可取决于验证的结果，并结合考虑上述原则。在考虑试验方法的官方认可时，以下标准也很重要（1）。
（1）方法的申请需要提供预测有关试验终点的数据，验证工作需要证明在：①新方法与现有方法；或②新方法与对目标物种的作用这两方面的任一方面有联系。
（2）新方法以风险评估为目的得到的数据，至少要同现有方法得到的数据同样有实用性，甚至要优于现有方法。这样可以在同等水平或是更高的水平上保护人类健康和环境。
（3）具有充分的受监管项目或监管机构管理的化学品和代表化学品产品类型的检测数据
（4）试验方法应该是稳定的、可转让的，并应考虑标准化。若是需要高度专业性的设备、材料及专业知识技能，应该努力寻求促进普适性。这是在验证研究早期阶段应该考虑的重要标准。【秘书处注释：根据现行的经合组织政策，试验不应要求设备或材料来自唯一的来源，这可能会阻碍专利方法的认可。在索尔纳研讨会上没有讨论专利试验的议题，但是在经合组织更高级别政策的议题中有所涉及】。
（5）试验具有成本效益，并可被应用。
（6）相对于现有可利用的所有方法，应该为新方法提供（科学、伦理及经济方面的）正当性。在这方面应适当考虑动物福利，包括考虑3R原则。
21.正如文件中所描述，虽然试验的验证过程分为非连续的几个阶段，但实际上，检验方法的验证过程在各个验证要素之间是统一连惯的。这个过程的每个阶段都是利用并建立在其他阶段工作的基础之上的。不管验证的方法是前瞻性、回顾性、模块式（11）或是其他方式，验证过程的目标是确保每个经合组织验证的原则都被充分考虑。因此，正如第七章所述，提供充足的验证文件是十分重要的。
22.文件中的特定词组及术语定义在附录Ⅰ有所解释，还简单举例说明了不同验证机构使用的验证术语。例如：体内及体外健康及生态毒理学研究的各种验证研究，详见附录Ⅱ。
23.此文件记录了在验证前和验证过程中应考虑的重要步骤及内容。它们包括：
（1）检验方法的定义及相关要点（例如：目的、判断标准、终点、局限性）；
（2）为得到最优的检验方法所作预验证的研究设计及实施方式；
（3）在预验证结果的基础上，以获取更多检验方法的相关性和可靠性的数据为目标，设计及实行正式的实验室间的验证工作；
（4）所有的数据评价及随后的验证研究的结论，应遵循管理机构关于新方法或修订方法试验操作相关信息呈递的要求。
还要讨论独立评价的需要及程度，或对待验证的检验方法进行同行评议。该指南提供了检验方法当前验证状态的纲要。