3.16 黄花乌头
黄花乌头为毛茛科乌头属植物Aconitum coreanum(Lèvl.)Rapaics的块根,具有祛风、化痰、燥湿和止痛等功效。黄花乌头的主要活性成分为生物碱类化合物,具有抗心痛血痹、中风痰壅、偏正头痛、风痰眩晕、风湿痹痛等药理作用,其中主要活性成分包括关附未素、关附巳素、关附庚素等。
【主要化学成分与结构】
【主要化学成分提取、分离】[21~23]
(1)分离方法一
(2)分离方法二
图3-39 黄花乌头粗提物的制备HSCCC分离图[22]
HSCCC条件:柱体积260mL;溶剂系统,正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.2mol/L HCl(1∶3.5∶2∶4.5),
上相作为固定相,下相作为流动相;流速4mL/min;进样量2.0g。1—关附巳素(10.4mg,纯度96.9%);
2—关附庚素(9.2mg,纯度95.7%);3—关附己素(9.5mg,纯度91.5%);4—附子碱(8.9mg,
纯度98.9%);5—关附甲素(11.9mg,纯度95.8%);6—关附壬素(25.7mg,纯度95.5%)
图3-40 黄花乌头分离后组分HPLC分析图[22]
HPLC条件:Diamonsil C18柱(4.6mm×250mm,5μm);紫外检测波长205nm;流速1.0mL/min;
流动相,2mg/mL正庚烷磺酸钠(磷酸调pH=3.0)(A)-乙腈(B),0~20min,17%~30% B;
20~40min,30%~35% B
(3)分离方法三
图3-41
图3-41 黄花乌头pH区带逆流色谱的分离图[23]
pH区带逆流色谱条件:柱体积300mL;溶剂体系,石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水,A,5∶5∶4∶6;
B,5∶5∶3∶7;C,5∶5∶1∶9,体积比),上相加入10mmol/L三乙胺作为固定相,下相加入10mmol/L的
盐酸作为流动相;进样量2.0g;流速2mL/min;检测波长254nm;转速850r/min;固定相保留率53%(a),
55%(b),62%(c)。1—关附壬素(356mg,纯度96.4%);2—关附甲素(578mg,纯度97.2%);
3—附子碱(74mg,纯度97.5%);4—关附己素(94mg,纯度98.1%);5—关附庚素(423mg,
纯度98.9%);6—关附未素(67mg,纯度98.3%);7—关附巳素(154mg,纯度98.4%)
图3-42 黄花乌头粗提物(a)及pH区带逆流色谱分离化合物的HPLC分析图[23]
HPLC条件:色谱柱Waters Symmetry Shield™ RP18柱(250mm×4.6mm,Ⅰ.D.,5μm);
柱温25℃;流动相,乙腈-2mg/mL正庚烷磺酸钠溶液(含有0.2%三乙胺,用磷酸调pH到3)
梯度洗脱,乙腈,0~10min,10%~30%;20~21min,60%~10%;21~30min,10%;
流速1mL/min;检测波长200nm。(b)关附壬素;(c)关附甲素;(d)附子碱;
(e)关附己素;(f)关附庚素;(g)关附未素;(h)关附巳素