二、CAR-T细胞治疗时肿瘤抗原靶点的选择^［16］

CAR-T细胞通过抗原-抗体的特异性结合来识别肿瘤细胞，不依赖于MHC抗原递呈的方式，因此可以克服肿瘤细胞因下调MHC和减少共刺激分子表达等所导致的肿瘤免疫逃逸。肿瘤细胞表面的蛋白质类和脂类抗原等，都可以作为CAR结合的靶点，能够识别更广泛的抗原分子。理想的CAR结合肿瘤抗原的靶点，应该是只在肿瘤细胞中表达，在正常组织中不表达，且位于肿瘤细胞的表面。目前用于CAR结构设计的肿瘤相关抗原（tumor associated antigens，TAAs）包括以下四类：

1.差异表达的TAAs

这类肿瘤相关抗原在肿瘤组织中高表达，但是在正常组织中低表达。如肝癌相关抗原α-AFP，结肠癌相关抗原CEA，乳腺癌和胃食管癌相关抗原HER-2，等等。

2.在肿瘤和非重要组织中表达的TAAs

如NKG2D配体、CD19和甲状腺球蛋白等。以这类抗原为靶点的CAR-T细胞，可能会对同时表达这些抗原的正常组织产生杀伤作用，引起免疫抑制功能异常（靶向NKG2D配体）、B细胞缺失（靶向CD19）、甲状腺组织受损（靶向甲状腺球蛋白）。

3.在肿瘤组织中特异性表达，在正常组织中不表达的TAAs

这类肿瘤靶点是过继细胞免疫治疗（adoptive cellular immunotherapy，ACT）最理想的TAAs。这类TAAs主要包括：①一些生殖肿瘤抗原家族成员；②在某些肿瘤中出现的特异性突变蛋白等，如在胶质母细胞瘤中表达的EGFRvⅢ、胰腺癌中表达的K-Ras、黑色素瘤中表达的B-Raf蛋白等；③一些在肿瘤组织中表达的具有致癌作用的病毒抗原（如：E6和E7人类乳头瘤抗原，LMP1和LMP2 EBV病毒膜蛋白等）。

4.与肿瘤基质成分相关的TAAs

如参与血管生成、基质重塑、成纤维细胞激活的分子，也能成为CAR-T细胞治疗的理想靶点。这类TAAs因为在正常组织中低表达，因此具有较低的细胞毒性杀伤作用。

实际上，癌细胞中任何的突变蛋白、过表达或异常表达的蛋白，都可以作为肿瘤疫苗或者T细胞治疗的靶点。为了寻找理想的肿瘤特异性抗原作为肿瘤疫苗的靶点，NCI开展了一项研究^［22］。理想的靶抗原应该符合：有治疗功能；有免疫原性；在肿瘤发生中扮演重要角色；特异性强；表达水平高和表达这类抗原的细胞的百分比高；在干细胞中表达；抗原在多数肿瘤患者中表达；具有一定数量的抗原表位；抗原在细胞的定位，等等。共筛选了75个有代表性的抗原，但是没有一个抗原符合上述要求，能够成为具有理想肿瘤抗原特征的肿瘤特异性抗原。

Safran等的一项研究表明，TCR-T细胞能进入胰管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinomas，PDA），修饰细胞外基质ECM，诱导肿瘤细胞死亡^［23］。因90%的PDA肿瘤细胞均有CEA的过表达，因此，可以将CEA作为CAR-T细胞治疗PDA的潜在靶点^［24］。HER-2受体酪氨酸激酶在20%的PDA中过表达^［23］，而CD24抗原也可以作为PDA治疗的靶抗原^［21］。