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一、 淋巴管铸型方法
(一) 铸型剂
我们所用的铸型剂为Mercox(CL-2B-5,Japan velene hospital,Tokyo),是一种合成树脂。将其用单体甲基丙酸稀释成25%~35%,再加入1%硬化剂MA(Japan velene hospital,Tokyo),吸入2ml或5ml注射器内,用26号(新4号)针头注射。
(二) 注射方法
在实验动物的小肠、胃和阑尾等器官进行注射。将针头分别刺入器官的黏膜下层、肌层和浆膜下层,在直视或解剖显微镜下注入铸型剂,注入压力凭手感掌握,以能有轻微阻力但又能缓慢推进为准。每个注射点连续注入0.5~1ml。直至观察到铸型剂已充分进入淋巴管并显示出淋巴管网为止。
(三) 铸型标本处理
切下注好的部位,将其黏膜面向上固定于塑料板上,放置30分钟~1小时后移入生理盐水中。置60℃温箱内2小时,以使铸型剂充分硬化。然后移入15% NaOH水溶液置于60℃温箱内数小时。取出样品用流水冲洗,注意不要损坏淋巴管的铸型。再依次放入10% 和5% NaOH水溶液各1小时,用流水冲洗数次后置于5% NaOH水溶液中,直到组织完全腐蚀显示出淋巴管铸型为止。在解剖显微镜下观察铸型的淋巴管网,并选择理想的部位制作扫描电镜观察的样品。