病原学阴性肺结核诊断治疗及质量控制
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一、痰标本采集、储存及运送

痰标本的采集、储存和运送任一环节的质量对于最终检测方法的实施和结果的准确性均有重要的影响,应予高度重视,严格按照要求实施。
(一)痰标本采集
(1)痰标本采集时间:
每位肺结核可疑症状者均应按照要求采集3份痰标本,根据痰标本采集的时间,可将标本分为3类:
1)即时痰:就诊时深呼吸后咳出的痰液;
2)晨痰:患者晨起立即用清水漱口后咳出的第2口、第3口痰液;
3)夜间痰:送痰前1日患者晚间咳出的痰液。
(2)痰标本采集方法:
对肺结核可疑症状者,临床医护人员应通过解释,使其充分了解痰标本质量对检查结果的影响,解释合格痰标本的性状,示范并指导其掌握从肺部深处咳痰的方法,告知患者采集痰标本时避免接触痰盒的内壁和盖子。如患者识字,可提供宣教材料。亦可提供或反复播放痰标本采集的小视频。
痰标本采集步骤:
1)痰标本采集前首先用清水漱口两次;
2)深呼吸3次,并屏住呼吸片刻,从肺深部剧烈咳嗽同时呼气;
3)将痰标本小心收集入痰盒内,手不要接触痰盒内壁和盖子,避免痰液泄漏到痰盒外部。具体步骤见图3-1。
如确实咳不出痰,可以尝试在运动(如慢跑、爬楼梯)后进行,或在采集痰标本前轻拍后背帮助咳痰。也可采用高渗盐水诱导痰或收集清晨胃液标本,或采用支气管镜采集支气管灌洗液标本。婴幼儿、儿童鉴于无法采集痰标本或支气管灌洗液,推荐采用胃液标本,通过胃灌洗吸出咽下去的痰液。
图3-1 痰标本采集流程及合格痰标本示意图
注意事项:医生、护士或实验室人员一定要告知患者如何采集痰标本及采集合格痰标本的重要意义,宣教对于患者采集合格性状及足够数量的痰标本有非常重要的作用。
(3)留痰场所:
由于患者咳嗽、咳痰时,易产生含有结核菌的飞沫,感染周边人群的概率较高,故采集痰标本时应在远离人群的开放空间进行,或在通风良好的留痰室内进行。留痰室应与其他场所进行物理隔离,装备外排风装置、紫外线灯和洗手设施等。
(4)痰标本质量评估:
患者留取的痰标本,应由检验人员或经培训的专人目视检查标本质量(特别是用于初次诊断的痰标本)。合格的痰标本一般为干酪痰、褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、黏液痰,标本量至少3ml。
除肉眼观察外观了解标本质量外,还可通过痰涂片细胞学检查判断,镜下显示检出鳞状上皮细胞数>25个/低倍视野为不合格痰标本,鳞状上皮细胞数<10个/低倍视野,白细胞数>25个/低倍视野为合格痰标本。
痰标本质量不合格时,实验室应拒收,并通知临床医生或护士进一步指导患者留痰方法并重新送检。若确实无法留取合格痰标本,应在进行细菌学检查时,在登记本和检验报告单标明痰标本不合格,以供分析结果时参考。
痰标本质量评估不合格时应从以下几方面进行分析:
1)患者因素:由于医护人员宣教少或不到位,患者不了解痰检的重要性或未掌握正确的痰标本采集方法,或者确实由于某些原因留痰困难造成痰少;
2)医护人员因素:医护人员责任心差,不重视或未开展对患者痰标本采集宣教指导,自身不了解或缺乏痰标本采集的相关方法和知识,未给患者及时发放采集容器;
3)其他:医生或护士与实验室无沟通协调机制,无痰标本采集质量评估和检查,送检不及时。
(二)痰标本储存
即时痰采集后立即送检,夜间痰和晨痰采集后推荐置于2~8℃冰箱临时保存,并尽快送至实验室检测。实验室收到标本后,应及时开展各种实验室检测,如不能及时检测,须将痰标本储存于2~8℃冰箱暂时保存,防止痰液干涸或污染,其中开展痰涂片镜检时标本采集到结果报告时间为24小时内,分离培养时标本采集到接种时间间隔不能超过7天。开展结核分枝杆菌分子生物学检查应尽量在7天内完成,若确实无法在7日内完成,可将痰标本放置于-20℃直至进行检测。
(三)痰标本运输
如本实验室内没有开展相关检测的条件,需要运送标本至其他实验室时,建议每周至少运送两次,若确实因距离遥远无法及时运送痰标本时,应将痰标本放置于-20℃冰箱保存直至运送至开展相关检测的实验室。
采集后无论运送距离远近都应按要求进行三层包装和标识。痰标本运送应按照国家相关生物安全要求进行,并使用适宜的制冷剂,将每份痰标本放置于一个可密封的塑料袋内,或者将痰盒直立放置于架子上,由经过培训的人员专人专车运送,确保对运送者、公众及接收实验室人员的安全。