神经解剖学(全国中医药行业高等教育“十四五”规划教材)
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(五)电子显微镜技术

电子显微镜简称电镜(electron microscope,EM)是用电子代替可见光,用电磁透镜代替光学透镜,利用电子的波动性将肉眼不可见的电子束成像在荧光屏上的显微镜。

在神经解剖学的研究中常用的电子显微镜主要为透射电镜(transmission electron microscope,TEM)和扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)。

透射电镜利用由电子发射器发射的电子束穿透样品,经电磁场透镜的聚合放大投射到荧光屏或照相胶片上成像,其分辨率为0.2nm,比光镜高1000倍,可放大几万倍到几十万倍,能观察到细胞内更微细的结构,在电镜下所见的结构称超微结构(ultrastructure),进行组织细胞透射电镜观察时需制作超薄切片(50~80nm),将超薄切片粘在金属载网上,再用染色剂铅盐和铀盐染色后,在电镜下观察。

扫描电镜是研究细胞和器官表面立体微细结构的电子显微镜,它利用电子发射到样品上,有一部分电子把样品表面原子的外层电子打落,称为“二次电子”,将其收集起来并使它们成像。它主要用于观察物体的表面形态,因而对样品的厚度没有限制,无须制作超薄切片,在样品处理上比较简单,只需经过固定、脱水及镀上一层金属薄膜就可以观察。其视场大、景深长,图像清晰富于立体感和真实感,特别适合于观察细胞的突起、微绒毛、神经纤维、微管、微丝等结构。