医学免疫学实验技术
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实验五 免疫器官形态学观察

免疫器官按其发生和功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。中枢免疫器官包括胸腺和骨髓,是免疫细胞发生、分化和成熟的场所。外周免疫器官包括淋巴结、脾脏和黏膜相关淋巴组织等,是成熟淋巴细胞(T细胞、B细胞)定居、增殖及接受抗原刺激发生适应性免疫应答的部位。

实验目的

了解 小鼠胸腺及脾脏的位置及形态。

基本原理

小鼠是啮齿目中体形较小的动物,淋巴系统很发达,包括胸腺、脾脏、淋巴管、外周淋巴结及肠道派氏集合淋巴结。小鼠的胸腺和脾脏是研究T细胞和B细胞特性与功能最主要的材料来源。观察其组织结构、细胞数目及活性等,可进一步了解该机体的免疫状况。本实验通过解剖小鼠来观察胸腺、脾脏等免疫器官的形态和位置。

实验材料

(1)小鼠(昆明种)。

(2)来苏尔水溶液(浓度3%)。

(3)镊子,剪刀,小鼠解剖台等。

实验方法

(1)小鼠脱臼处死,投入盛有来苏尔水溶液的缸内,浸泡5分钟。取出小鼠,仰卧位置于小鼠解剖台上,使小鼠腹部朝上。

(2)用镊子提起小鼠耻骨处皮肤,用剪刀沿腹正中线剪开至下颌部,然后钝性分离皮肤,再把皮肤向四肢剪开。

(3)注意观察腹壁,用剪刀沿腹正中线自阴部至膈肌为止剪开,观察脾脏的位置及大小。观察后将脾脏完整取出,剪去脂肪及筋膜组织,吸干,称重,按下列公式计算脾脏指数:

脾脏指数(SI)=脾脏重量(mg)/小鼠个体重量(g)×10

(4)切开膈肌,剪断胸骨及两侧肋软骨,翻起胸骨,观察胸腺,胸腺位于小鼠胸骨后,心脏前上方,内有许多大淋巴细胞(即前胸腺细胞)及特定的上皮网状细胞(分泌胸腺激素)。观察后将胸腺完整取出,吸干,称重,按下列公式计算胸腺指数:

胸腺指数(TI)=胸腺重量(mg)/小鼠个体重量(g)×10

(5)解剖结束后,按实验室要求处理动物。

实验结果

(1)操作应轻柔仔细,剥离胸腺时要特别小心,以保证两叶完整性。

(2)计算胸腺及脾脏指数时,尽量将胸腺及脾脏完整取出,并去掉其他组织,以利于准确计算。

注意事项

胸腺指数和脾脏指数是每10克体重脏器的重量(mg),其指数高低取决于胸腺和脾脏中淋巴细胞增殖的程度,可初步估计免疫功能的强弱,对于判断免疫功能的强弱具有一定的临床意义。