实验五　淀粉酶发酵培养过程

了解淀粉酶生产菌的生长规律和产淀粉酶的代谢规律。

淀粉酶作为产生菌的代谢产物，与菌体的生长有关联作用。

配制培养基，灭菌、接种、培养，定时取样测定OD值，绘制生长曲线，计算发酵参数。

1.培养基

高产淀粉酶菌株斜面或培养液。

2.器材

高压锅、恒温摇床、振荡培养箱、显微镜、分光光度计、吸水纸、计数器、滴管、擦镜纸。

1.配制

每组配制1000mL培养液。每组以4人计，每人做2～3瓶，共10瓶，每瓶装液体培养基100mL，计1000mL。称样后加入容器中，加少量水，搅拌并适当加热加水溶解。用量筒分装在培养瓶中，每瓶装95mL培养液。用8层纱布或棉塞或聚丙烯薄膜封口。

2.灭菌

0.1MPa，20min。冷却后出锅，取出，放入超净工作台中风冷，用紫外线照射20min。

3.接种

用无菌的5mL或10mL小量筒或移液管接种，每瓶等量接入5mL菌种。

4.培养

接种后的培养瓶放在振荡培养箱或恒温摇床上培养，温度为30℃，150r/min。

5.测定

定时测定培养瓶中培养液的OD值。每次重复测定3次以上。计算平均值。

6.绘制

绘制生长曲线，计算生长曲线方程（表1-2）。

表1-2　生长曲线测定　　

1.绘制淀粉酶活力曲线。

2.绘制生长曲线。

3.比较淀粉酶活力和生长曲线，说明二者之间的关系。